午夜夫妻试看120国产,最近中文字幕在线资源,久久这里只有精品无码3d,成人免费看吃奶视频网站

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 消滅 PCR 非特異性擴增的方法

    消滅 PCR 非特異性擴增的方法

    發(fā)布時間: 2023-06-28  點擊次數(shù): 1295次
    非特異性擴增,即進行 PCR 所擴增出來的條帶不是所要的,引物與模板在非目的條帶處有錯配,導(dǎo)致延伸產(chǎn)物不是目的條帶。例如引物二聚體,即引物在退火過程中產(chǎn)生了 hairpin 結(jié)構(gòu)或其他二級結(jié)構(gòu),或者引物在模板的某些位置非特異性地結(jié)合,也同樣會產(chǎn)生非特異性擴增。PCR 產(chǎn)物都是通過引物延伸產(chǎn)生的。當(dāng)引物產(chǎn)生了二聚體或者非特異性擴增產(chǎn)物之后,引物本身就無法再延伸形成 PCR 產(chǎn)物了,這樣的情況下,非特異性擴增產(chǎn)物越是多,那目的產(chǎn)物就越是少。如果在 qPCR 過程中,就會在熔解曲線中形成雙峰。

    消滅 PCR 非特異性擴增的方法:
    1、引物設(shè)計的過程中要用 Primer premier 5.0 來驗證一下二聚體;
     
    2、 引物合成后,先做一次梯度 PCR,檢測最合適的退火溫度,一般高退火溫度可以提高引 物對模板的特異性從而降低引物二聚體;
     
    3、 降低 Mg2+濃度,鎂離子濃度高,會導(dǎo)致大量的非特異性擴增,但是沒有鎂離子的話,也會導(dǎo)致 Taq 酶的失活;
     
    4、降低 dNTP 濃度,dNTP 也是非特異性擴增的一個罪魁禍首,降低它的濃度,也能有效降低二聚體及其他非特異性擴增;
     
    5、降低引物濃度,一般的 PCR 引物都是過量的,降低了引物濃度自然也能降低引物之間形成二級結(jié)構(gòu)的可能性;
     
    6、提高退火溫度,這個道理很簡單,引物的退火溫度提高,引物間的二級結(jié)構(gòu)形成可能性就會降低;
     
    7、延長退火時間,這個也可以減弱引物間結(jié)合的可能性;
     
    8、DMSO 及甜菜堿,這些 PCR 促進劑,主要是用于 CG 含量高的模板上,降低 DNA 的二級結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生,但根據(jù)經(jīng)驗,加入 DMSO 之后需要同時提高一點退火溫度來補平(qPCR 不太適用);
     
    9、熱啟動法,通過 95℃的高溫?zé)釂?,高溫解鏈,使得引物間的二級結(jié)構(gòu)破壞,以此降低二聚體產(chǎn)生。


    深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實力、壹流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)。總部設(shè)在廣東,服務(wù)面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線,在各個領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。


產(chǎn)品中心 Products
欧美最猛性XXXXXX| 国产偷国产偷亚洲清高| 国产99在线 | 亚洲| 亚洲av无码国产精品麻豆天美| 少妇人妻好深太紧了A| 午夜精品久久久久久久无码| 亚洲加勒比久久88色综合| 午夜成人理论无码电影在线播放| 亚洲精品v天堂中文字幕| 国模少妇一区二区三区| 国产精品嫩草影院| 久久午夜福利无码1000合集| 亚洲av无码一区二区二三区| 色精阁久艾草国产WWW| 亚洲综合伊人久久综合| 男男啪啪激烈高潮cc漫画免费| 狠狠综合久久av一区二区| 国产精品久久久久久岛| 精品国产乱码久久久久久| 国产男女猛烈无遮挡免费视频| 蜜臀AV性久久久久蜜臀AⅤ麻豆| 国产国产国产国产系列| 无套内谢少妇毛片a片| 亚洲av无码乱码国产精品fc2| 性按摩XXXX在线观看| 中文字幕乱码亚洲无线码| 国内自产少妇自拍区免费| 久久精品水蜜桃av综合天堂| 亚洲娇小与黑人巨大交| 男女一对一免费视频| 无码精品日韩专区第一页| 亚洲AV无码乱码在线观看代蜜桃| 国产成人久久777777| 国产在线 | 欧洲| 老色69久久九九精品高潮| 成人无码免费a片免费看软件| 日本一区二区在线播放| 成人区人妻精品一区二区不卡网站| 久久精品国产亚洲欧美| 日本孕妇大胆孕交无码| 国产95在线 | 欧美|